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8 arm-PEG10k-Mal,Maleimide-PEG-8 ARM,八臂聚乙二醇馬來酰亞胺
聚乙二醇修飾(PEGylation)能夠有效降低藥用蛋白質的免疫原性和抗原性,延長在體內的循環半衰期。干擾素beta1b是一種強疏水性蛋白。
先優化了干擾素beta1b的純化工藝,得到了高純度、結構及活性正確的蛋白,然后采用聚乙二醇修飾劑SC-mPEG分別在水溶液和含2-丁醇的有機溶劑中對干擾素beta1b進行修飾,在修飾劑與蛋白質比例為1∶1時,2-丁醇溶劑中的修飾率從水相的2%提高到39%;當修飾劑比例提高到5∶1時,總修飾率從水相的13%提高到有機溶劑的94%。原子力顯微鏡和動態光散射對蛋白聚集行為研究發現,干擾素beta1b在含2-丁醇的有機溶劑中聚集體顆粒更小,分布更加均一,從而產生更多的蛋白單體與修飾劑反應。
水溶液中添加一定比例的乙醇同樣可以有效提高蛋白的修飾率,當乙醇濃度為20%時,干擾素beta1b的單修飾率可以提高20%。通過結構比較發現,一定比例的乙醇溶劑同樣會導致蛋白結構發生可逆性改變,增加修飾反應位點進而提高修飾率。
以G-CSF為模型,選用對蛋白質有良好相溶性的純有機溶劑DMSO進行蛋白有機相修飾研究。研究發現,修飾劑SC-mPEG、MAL-mPEG和ALD-mPEG在DMSO中均無水解,并且在低修飾劑用量下,3種修飾劑對G-CSF的修飾率均提高30%以上。采用stopped-flow裝置研究修飾反應動力學發現,蛋白質在有機相中的反應速率是水相反應速率的103-105倍。與傳統水相修飾相比,
建立的蛋白質有機相PEG修飾新方法能提高修飾率20%以上,修飾劑用量降低70%-90%,同時修飾反應時間可縮短5-10倍。
產品名稱:8 arm-PEG10k-Mal,Maleimide-PEG-8 ARM,八臂聚乙二醇馬來酰亞胺
中文名稱:八臂聚乙二醇馬來酰亞胺
英文名稱:8 arm-PEG10k-Mal,Maleimide-PEG-8 ARM
PEG分子量:1/2/3.4/5/10K分子量可選
形態:固體或粉末,取決于分子量
溶解性:溶于大部分有機溶劑
規格:mg
純度:95%+
儲存:-20℃
用途:科研
供貨商:西安瑞禧生物科技有限公司
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西安瑞禧用于科研,不可用于人體,RL2023.6
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